Centrum asistované reprodukce Gynekologicko-porodnické kliniky FN Brno

Embryologické techniky oplození a další výkony

Mikromanipulační techniky - ICSI, AH

Jde o laboratorní techniky, rozšiřující možnosti asistované reprodukce. Jejich provádění je vysoce odborně a technicky náročné a je podmíněno nákladným mikromanipulačním zařízením.

Podstatou mikromanipulací je práce s jednotlivými oocyty (vajíčky) a spermiemi nebo embryi pod mikroskopem pomocí speciálních skleněných mikropipet.

Provádíme dva typy mikromanipulací: ICSI a AH

ICSI - Intracytoplasmatická injekce spermie

Metoda spočívá v přímé injekci jediné spermie do cytoplasmy zralého oocytu. Vybraná spermie je znehybněna, nasáta do mikroinjekční pipety a pomocí mikromanipulačního zařízení vpravena do oocytu.

Indikací k použití ICSI je:

selhání oplození vajíček v předchozích cyklech
nízká koncentrace a pohyblivost spermií.
získání spermií chirurgickým odběrem z varlete nebo nadvarlete (= MESA/TESE)
potřeba provedení preimplantační genetické diagnostiky (PGD)
na žádost pacientky

Ne všechna vajíčka, která se při odběru získají, jsou kvalitní a tudíž schopna oplození a následného vývoje. Počet oocytů, které se budou touto metodou oplozovat, je závislý na přání páru a na počtu a kvalitě získaných vajíček. Oplozená vajíčka se vyvíjí v embrya.

AH - asistovaný hatching

Tuto mikromanipulační techniku provádíme na embryích po prodloužené kultivaci před jejich přenosem do dělohy. Princip metody spočívá v šetrném otevření obalu embrya (zona pellucida) mikropipetou. Vytvoření malého otvůrku umožní snazší uvolnění embrya ze zona pellucida.

Cílem je zvýšit úspěšnost uchycení (implantaci) embryí v děloze.

Indikací AH je:

věk pacientky nad 35 let
opakované nedosažení těhotenství po transferu kvalitních embryí
zvýšená hodnota FSH u pacientky
zjištění silnějšího obalu embrya
na žádost pacientky

Rozhodnutí, kdy provádět mikromanipulace, závisí na zvážení všech nám dostupných indikací a na žádosti pacientky.

Kultivace embryí

Klasická kultivace embryí

Po klasické kultivaci zavádíme do dělohy embrya ve stadiu 2 až 4 buněk, tj. po 48 hodinách po oplození vajíček. V tuto dobu ještě nejsme schopni vybrat ta nejkvalitnější embrya vhodná na transfer a oddělit embrya s omezenou schopností se dále vyvíjet.

Prodloužená kultivace embryí

Prodloužená kultivace je metoda umožňující prodloužit délku kultivace oplozených vajíček až na 120 hodin. Provádí se v nákladných speciálních médiích. Délka kultivace je u každé pacientky individuální. Záleží na kvalitě embryí, rychlosti jejich rýhování a také na přání pacientky.

3 - 5 denní kultivace umožňuje delší sledování vývoje embryí. Lze tak dosáhnout 8-buněčného stadia, moruly, a v některých případech až stadia blastocysty. Tak lze snáze vybrat nejkvalitnější embrya pro transfer. Snížíme pravděpodobnost zavedení embryí s omezenou schopností buněčného dělení. Embrya po prodloužené kultivaci jsou transferována do lépe připravené děložní sliznice a mají vyšší šanci na uchycení.

Naše výsledky dokazují vyšší procento dosažených těhotenství po transferu embryí s prodlouženou kultivací.

Zmražování embryí

Kryokonzervace je proces šetrného zmražení embryí. Cílem je uchovat embrya vzniklá po mimotělním oplození v případech:

po oplození vznikne více kvalitních embryí, než lze transferovat do dělohy.
na základě laparoskopického nálezu je doporučeno transfer odložit pro riziko mimoděložního těhotenství. Transfer rozmražených embryí lze provést po chirurgické léčbě.
vyvine-li se v průběhu stimulace u pacientky tzv. hyperstimulační syndrom. Vzhledem k možným následným komplikacím je vhodné odložit transfer do doby úplného zklidnění vaječníků.
nečekaně vzniklé zdravotní, organizační nebo technické obtíže neumožňující provedení transferu.
kryokonzervace v programu dárcovství oocytů.
uchování embryí před radioterapií nebo chemoterapií.

Embrya jsou zmražena nejvýše po 2 nebo 3 kusech. Skladována jsou v pejetách ve speciálních kontejnerech s tekutým dusíkem (viz obrázek výše).

Jak dlouho skladujeme zmražená embrya?

Nedojde-li k otěhotnění v cyklu, ve kterém byla embrya zmražena, jsou tato skladována nejdéle 18 měsíců ode dne zmražení. Při dosažení těhotenství ukončeného porodem, je délka skladování embryí prodloužena na 48 měsíců. Po uplynutí této doby je skladování zmražených embryí ukončeno.

Skladování zmražených embryí lze předčasně ukončit na základě písemné žádosti obou partnerů. Prodloužit skladování embryí lze jen na základě písemné žádosti obou partnerů. Doplatek za prodloužení délky skladování (50,- Kč/ měsíc) se hradí zpětně při následujícím přenosu embryí po rozmražení (KET).

KET - přenos embryí po rozmražení

Den provedení kryoembryotransferu (KET) je stanoven po přípravě sliznice v děloze pomocí hormonálních tablet. Embrya jsou po rozmražení 24 hod. kultivována. Lze tak vybrat na transfer embrya, která se po rozmražení nejlépe vyvíjejí. Tato jednodenní kultivace je bezplatná a zvyšuje úspěšnost KET.

Je nutné, aby pacientka v den před plánovaným provedením transferu v době 9.00 - 9.30 hod. zatelefonovala do embryologické laboratoře. Bez telefonického potvrzení nebudou embrya rozmražena.